REAL TIME PCR TRONG NGHIÊN CỨU GEN NGƯỜI - HUMAN GENETICS
LACTOSE INTOLERANCE REAL-TIME PCR GENOTYPING KIT
NGHIÊN CỨU GEN NGƯỜI - HUMAN GENETICS
|
STT
|
Tên bộ kits
|
Mô tả tổng quát
|
Chứng chỉ
|
18
|
Lactose Intolerance Real-Time PCR Genotyping Kit
(Phát hiện và chẩn đoán tình trạng không dung nạp lactose)
|
Phương pháp phát hiện: Rt
Mẫu xét nghiệm: máu ngoại vi toàn phần
Phương pháp tách chiết DNA: PREP-GS-GENETICS, PREP-RAPID-GENETICS
Định dạng bộ kit: non-pipetted (tube nên được mua thêm)
Nhiệt độ bảo quản: +2 .. + 8 ºС;
polymerase TechnoTaq AT: -20 ºС
Thời hạn sử dụng: 6 tháng
|
CE/IVD
|
Lactose là một loại đường có trong sữa, chiếm khoảng 99% lượng carbohydrates trong sữa. Dưới ảnh hưởng của lactase trong đường tiêu hóa, lactose phân chia thành glucose và galactose, điều này xảy ra sau khi các monosaccharides này được hấp thụ. Nếu có quá nhiều lactose chưa tiêu hóa trong ruột (hoạt động của lactase bị phân tách bị giảm), và có đủ vi khuẩn axit lactic, thì lactose chưa tiêu hóa lưu lượng nước từ cơ thể vào khoang ruột, dẫn đến phân lỏng (tiêu chảy) , đau đớn, ầm ầm và đầy hơi. Tình trạng này được gọi là thiếu lactase hoặc không dung nạp lactose - Lactose Intolerance (LI) .
Theo mức độ nghiêm trọng, LI được chia thành:
-
Không dung nạp lactose một phần;
-
Không dung nạp lactose hoàn toàn.
Theo nguồn gốc, có hai loại không dung nạp lactose chính:
-
Không dung nạp lactose nguyên phát. Nó được chia thành:
-
Bẩm sinh (xác định di truyền, gia đình);
-
Tạm thời (thường gặp ở trẻ sinh non);
-
Kiểu người lớn.
-
Không dung nạp lactose thứ phát do nhiễm trùng đường ruột, cũng như bất kỳ đường tiêu hóa nào.
Quá trình tiêu hóa đường sữa có liên quan đến hoạt động của lactase-phlorizin hydrolase (lactase hoặc beta-D-galac-toside hydrolase). Lactase-phlorizin hydrolase được mã hóa bởi một locus di truyền đơn trên nhiễm sắc thể 2. Sự xuất hiện của hấp thu kém lactose bẩm sinh ở trẻ sơ sinh (alactasia ở trẻ sơ sinh) và kém hấp thu lactose bẩm sinh khi khởi phát muộn (ở người lớn) có liên quan đến tổng hợp lactase bị suy giảm về mặt di truyền. Giảm bẩm sinh trong hoạt động lactase - hypolactasia - được thừa hưởng trong cơ chế lặn tự phát. Kiểu hình lactase cuối cùng được hình thành trong một phạm vi tuổi rộng: từ 5-6 năm trong tiếng Nhật đến 20-21 năm trong Phần Lan [100, 114].
Nó đã được chứng minh rằng khu vực gen MCM6 là một trong những yếu tố điều tiết quan trọng nhất của gen lactase.
Nó cũng đã được xác định rằng locus đa hình -13910 T> C có liên quan đến không dung nạp lactose [3, 40, 96, 136].
Chỉ định phân tích di truyền:
-
Kiểm tra trẻ bị nghi ngờ không dung nạp lactase bẩm sinh;
-
Chẩn đoán phân biệt không dung nạp lactose và các bệnh đường tiêu hóa khác ở trẻ lớn hơn một tuổi và ở người lớn.
DNA-Technology đã phát triển bộ kits (xem Bảng 59 và 60) để xác định các đa hình liên quan đến rối loạn chuyển hóa lactose bằng phương pháp real-time PCR.
Table 59. Đa hình di truyền liên quan đến rối loạn chuyển hóa lactose.
Gene
|
Chức năng
|
Đa hình
|
Định danh*
|
Possible genotypes
|
Ảnh hưởng của đa hình
|
MCM6
lactase- phlorizin
hydrolase
|
Điều chỉnh biểu hiện gen LCT (gen lactase), do đó tham gia vào quá trình thủy phân lactose.
|
-13910 T>C
|
rs 4988235
|
T/T
|
Không có bất thường
|
T/C
|
Giảm biểu hiện gen MCM6. Tăng nguy cơ thiếu hụt lactase thứ phát
|
C/C
|
Giảm biểu hiện gen MCM6 dẫn đến không dung nạp lactose ở người lớn
|
* Ghi nhãn trong cơ sở dữ liệu dbSNP của Trung tâm Thông tin Công nghệ Sinh học Quốc gia, NCBI
Bảng 60. Lactose Intolerance Real-Time PCR Genotyping Kit
Số tests
|
48 tests
|
Định dạng thuốc thử
|
Not pre-aliquoted
|
Taq-AT polymerase
|
1 tube (48 mcl)
|
PCR buffer
|
1 tube (480 mcl each)
|
Mineral oil
|
1 tube (960 mcl)
|
Đa hình được xác định
|
MCM6: -13910 T>C – 960 mcl
|
Mẫu để phân tích
|
Máu toàn phần
|
Công nghệ:
-
Chỉ sử dụng công nghệ PCR melting;
-
Không được phép sử dụng các công nghệ khác.
Nhiệt độ lưu trữ: +2 đến +8°C (-20°C đối với Taq-AT-polymerase).
Thiết bị cần thiết để phân tích:
Các thiết bị DT được sản xuất bởi DNA-Technology: DTlite, DT- prime.
Máy real time PCR “DTprime” và “Dtlite” – HSX: DNA – Technology
Nhà phân phối độc quyền tại Việt Nam: Công ty TNHH Thiết Bị BDE
Bộ kits tách chiết DNA:
-
PREP-RAPID GENETICS;
-
PREP-GS GENETICS
Số lượng DNA tối thiểu để phân tích: 1.0 ng cho ống khuếch đại.
Tài liệu tham khảo: DNA-Technology
Quý khách hàng vui lòng liên hệ với BDE – đơn vị phân phối độc quyền tại Việt Nam để được tư vấn miễn phí:
Công ty TNHH Thiết Bị B.D.E
Số 44, TT 3 - Khu Đô Thị Văn Phú - Hà Đông - Hà Nội
Tel : 02466 807 528 Fax 0433 513 114
Hotline 097 664 11 99