Điện di tập trung đẳng điện (IEF)

Điện di tập trung đẳng điện (IEF) có thể được mô tả như một quá trình để tập trung và đồng thời tách protein.

IEF sử dụng một gradient pH được hình thành bởi các phân tử lưỡng tính nhỏ (ampholytes). Các ampholytes của CarrierALYT để phân giải protein theo các giá trị pI khác nhau của chúng (pI: điểm đẳng điện). IEF là một phương pháp điểm cuối - khi quá trình chạy điện di được hoàn thành, các protein sẽ xuất hiện dưới dạng các vùng sắc nét, riêng biệt, theo thứ tự pI của chúng.

Một số ứng dụng của IEF như:

Nông nghiệp: Ngô; Lúa mì; Cao lương; Cà rốt; Khoai tây...

Thú y: Thịt heo; Gia súc; Gà tây; Gà...

Thực phẩm: Thịt; Phô mai; Mỳ...

Y tế: Đa xơ cứng; EPO; Kháng thể; Protein tái tổ hợp

 

1. Serva Gels cho điện đi ngang IEF

Các gel SERVALYT ™ PRECOTES  có một lớp gel rất mỏng với thời gian tách và quá trình nhuộm ngắn. Do lớp mỏng, gel chỉ cần khối lượng mẫu nhỏ để sử dụng. Gel SERVALYT ™ PRECOTES ™ được khuyên dùng cho một loạt các thử nghiệm QC trong kiểm soát thực phẩm và đồ uống, xác định loài và các yêu cầu đòi hỏi phải phát hiện các dải rất nhạy.

Gel cũng có sẵn dưới dạng SERVALYT ™ PreNets đi kèm với bộ đổ đúc, phù hợp lý tưởng cho các ứng dụng Blotting.

Gel Blank PRECOTES ™ / PreNets ™ là một giải pháp tuyệt vời để thực hiện IEF ở mọi giá trị pH. Những loại gel này không chứa ampholytes (“blank”), thích hợp cho việc cân bằng với ampholytes của sự lựa chọn và urea.

FocusGels được cung cấp với một lớp gel 0,65 mm, khiến chúng ít nhạy cảm hơn với "hiệu ứng muối" so với SERVALYT ™ PRECOTES. Do khả năng đệm cao, đây là loại gel được lựa chọn cho tất cả các mẫu phân tách muối như huyết thanh và dịch não tủy, tế bào và chiết xuất mô. Một trong những ứng dụng quan trọng nhất là tách các dải oligoclonal trong chẩn đoán đa xơ cứng. FocusGels chứa SERVALYT ™ được thiết kế để đạt được giá trị độ pH tối ưu. Do độ dày của lớp, các dung dịch điện cực và dải điện cực là không cần thiết và các điện cực được đặt trực tiếp trên bề mặt gel. FocusGels có sẵn với 24 vị trí, 40 vị trí hoặc không có.

EPO Doping IEF Kit 30S được áp dụng trong phân tích erythropoietin (EPO). Bộ EPO Doping IEF Kit 30S đã được phát triển để phân biệt EPO tự nhiên và EPO tái tổ hợp trong điều khiển doping theo NADA / WADA. Bộ Kit chứa bốn EPO IEF Clean với 30 giếng mẫu được tạo sẵn, một bộ đệm cho EPO, bộ bù nước, ampholytes mang chất mang đặc trưng của EPO và bảng sấy.

2. SERVA Gel cho Vertical IEF.

SERVAGel ™ IEF là các gel đúc sẵn cho IEF ở định dạng gel mini. Các gel được đúc thành với kích thước 10 x 10 x 0,7 cm và có thể được chạy trong bộ điện di đứng Mini. Gel đúc sẵn có phạm vi pH từ 3 - 10. Đối với các ứng dụng tiêu chuẩn, ứng dụng mẫu đặt ở catốt.

Đối với các mẫu protein cơ bản (> pH 7,5) có thể được áp dụng anodic để thực hiện NEPHGE (= điện di pH gradient không cân bằng).

3. SERVA protein chuẩn cho IEF.

SERVA cung cấp hai protein chuẩn khác nhau để xác định pI chính xác các protein chưa biết bằng IEF.

Protein chuẩn được áp dụng cho tất cả các gel IEF, ngang và dọc. Chất chuẩn chứa 9 protein mỗi loại, 13 đồng phân tạo thành một mô hình đặc trưng.

4. SERVALYT Carrier Ampholytes

ServaLYT Carrier ampholytes là các phân tử có trọng lượng phân tử thấp có đặc tính zwitterionic. Chúng là hỗn hợp của các loài có nguồn gốc tổng hợp có phân bố trọng lượng phân tử trung bình từ 400 đến 1000 dalton và bao gồm vô số giá trị pI khác nhau. Trong gel agarose và polyacrylamide có chứa ampholytes, một gradient pH tuyến tính sẽ được hình thành khi chạy trong điện trường - các phân tử ampholyte mang điện tích và sẽ di chuyển trong điện trường giữa các điện cực và mẫu sẽ đạt đến vị trí pI tương ứng. Mẫu sẽ ngừng di chuyển và tập hợp ở vị trí đó.

5. Phim và fabric hỗ trợ cho gel đúc

Gel-Fix ™ cho PAG là một màng polyester (180 um) trơ về mặt hóa học, trong suốt, được kích hoạt trên cả hai vị trí để liên kết hóa trị một loại gel polyacrylamide (PAG). Gel dính vào màng trong suốt quá trình điện di và tất cả các quy trình sửa chữa và nhuộm màu tiếp theo.

Để bảo vệ lớp gel chống khô hoặc hư hỏng, SERVA cung cấp Gel-Fix cho bọc, một màng polyester tráng (75 um) với một lớp ưa nước để ngăn chặn sự bám dính của gel. Đối quá trình Blotting tiếp theo, NetFix cho PAG được khuyến khích để cung cấp hỗ trợ gel tối ưu. Fabric polyester được kết hợp vào gel trong quá trình đúc. Nó không tương tác vào quá trình điện di hoặc blotting.

Phim hỗ trợ cho tất cả các loại gel polyacrylamide và agarose

Có thể được cắt thành mọi kích thước mong muốn

Ổn định nhiệt độ lên tới 110 ° C

Định dạng tùy chỉnh có sẵn theo yêu cầu

6. Thuốc thử và phụ kiện cho IEF

Các dung dịch acrylamide / bis, acrylamide và N, N, - methylene bisacrylamide đã sẵn sàng sử dụng cho gel với tỷ lệ acrylamide / bisacrylamide mong muốn. Các dung dịch được làm từ acrylamide tinh khiết cao và N,N-methylene bisacrylamide, ổn định và ứng dụng được thử nghiệm trong tập trung đẳng điện. Giảm thiểu rủi ro sức khỏe và tối ưu hóa kết quả.

Agarose SERVA trung tính cho IEF là một loại agarose cao cấp để tập trung đẳng điện, được xử lý hóa học để trung hòa các vị trí điện tích âm còn sót lại, hầu như loại bỏ hiện tượng nhiễm điện.

7. Bộ nhuộm cho Gel IEF.

Tùy thuộc vào độ nhạy cần thiết và  ứng dụng gel IEF có thể được nhuộm màu bởi SERVA Blue W, SERVA Violet 17 hoặc bằng bạc. Bộ nhuộm màu SERVA Violet 17 là một giải pháp nhanh chóng và tiện lợi để nhuộm gel nhanh chóng trong các ứng dụng thông thường.

SERVA cung cấp hai bộ dụng cụ nhuộm màu bạc khác nhau để nhuộm các dải protein có độ nhạy cao.

+ Để nhuộm gel trong chẩn đoán bệnh đa xơ cứng (MS), Bộ nhuộm màu bạc SERVA CSF đã được phát triển.

Bên cạnh đó là bộ Kít hoàn chỉnh, một dòng sản phẩm toàn diện về thuốc nhuộm và thuốc thử nhuộm gel IEF.

8. Thiết bị chạy cho điện di tập trung đẳng điện

Mặc dù có chất lượng cao về gel và thuốc thử, thiết bị là yếu tố chính để đạt được kết quả tốt nhất trong điện di. Chỉ sử dụng các buồng điện di cung cấp một điện trường đồng đều trong quá trình chạy và cung cấp nguồn điện đáng tin cậy để có quá trình phân tách hoàn hảo.

SERVA đã phát triển HPE ™ BlueHoriz ™, HPE ™ BlueTower, BlueVertical ™ PRiME ™, BluePower ™ Power supply và BlueShake 3D với sự hợp tác chặt chẽ với các nhà nghiên cứu trên toàn thế giới. Các thiết bị được sản xuất tại Đức theo các thông số kỹ thuật được xác định bởi SERVA.

a. Bộ điện di HPE ™ BlueHorizon là một hệ thống phẳng cho hiệu suất tối ưu trong chạy 1D SDS PAGE, 2D PAGE, native PAGE và IEF. Các hệ thống bao gồm nguồn điện và bộ phận làm mát.

b. BlueVertical PRiME

Hệ thống bể điện di đứng  đã được phát triển để chạy gel đúc sẵn cho ứng dụng  1SDS PAGE, mà còn trong các ứng dụng 2D PAGE, native PAGE, IEF hoặc axit nucleic. Hệ thống kẹp sáng tạo giữ cho các gel ở vị trí chính xác, không bị rò rỉ và lắp đặt nhanh chóng.

c. Bộ nguồn BluePower

Bộ nguồn BluePower dễ vận hành và có thể lập trình đầy đủ. Thay đổi thông số mà không làm gián đoạn quá trình chạy. Bộ nguồn có vỏ kim loại ổn định và màn hình LCD lớn.

d. Máy lắc 3D

Sàn lắc rộng 35 x 35 cm và độ nghiêng góc 4o. là lựa chọn tốt nhất cho quá trình nhuộm gel.

e. Máy chụp ảnh gel DIAS –III

Hệ thống chụp và phân tích ảnh DIAS- III là giải pháp lý tưởng để thực hiện các nhiệm vụ hàng ngày cho quá trình chụp và phân tích gel 1D. Phần cứng bao gồm máy ảnh DSLR và phần mềm phân tích. Bộ chuyển đổi ánh sáng UV-, xanh lam và trắng hoặc ánh sáng trắng epi là tùy chọn.

Quý khách hàng vui lòng liên hệ với BDE – đơn vị phân phối độc quyền tại Việt Nam để được tư vấn miễn phí:

Công ty TNHH Thiết Bị B.D.E

​Số 44, TT 3 - Khu Đô Thị Văn Phú  - Hà Đông - Hà Nội

Tel : 02466 807 528          Fax 0433 513 114

Email : info@bde.vn

Hotline 097 664 11 99

Website: www.bde.vn